觀察綠色熒光蛋白的儀器有哪些？

能夠激發(fā)綠色熒光蛋白的發(fā)出熒光的主要有熒光顯微鏡、熒光體視顯微鏡、便攜式熒光蛋白激發(fā)光源、臺(tái)式熒光蛋白激發(fā)光源等產(chǎn)品。熒光顯微鏡需要對(duì)觀察的目標(biāo)進(jìn)行切樣觀察，而手持的便攜式熒光蛋白激發(fā)光源無(wú)需破壞觀察目標(biāo)可以直接觀察，特別是觀察熒光蛋白在種子、愈傷、葉片等的表達(dá)，非常方便，佩戴上熒光觀察眼鏡，打開熒光蛋白激發(fā)光源的開關(guān)就可以直接觀察到熒光表達(dá)的效果。

LUYOR-3415RG激發(fā)光源效果圖

傳統(tǒng)的熒光顯微鏡觀測(cè)熒光蛋白有很多局限性，上海峰志儀器有限公司代理銷售的美國(guó)路陽(yáng)生產(chǎn)的便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈給轉(zhuǎn)基因研究工作者帶來(lái)了便捷性，無(wú)需取樣，打開觀測(cè)燈直接照射熒光蛋白，肉眼就能清晰看到熒光蛋白在葉片、愈傷、種子、菌落等載體上的表達(dá)。無(wú)論是綠色熒光蛋白、黃色熒光蛋白或紅色熒光蛋白，一臺(tái)觀測(cè)燈就能直接觀測(cè)2種熒光蛋白的表達(dá)。現(xiàn)上海峰志儀器有限公司技術(shù)工程師針對(duì)綠色熒光蛋白的觀測(cè)原理、幾種觀測(cè)方法介紹如下：

綠色熒光蛋白(GFP)：

綠色熒光蛋白GFP吸收的光譜峰值為395nm（紫外），并有一個(gè)峰值為470nm的副吸收峰（藍(lán)光）；發(fā)射光譜峰值為509nm（綠光），并帶有峰值為540nm的側(cè)峰。雖然450～490nm只是GFP的副吸收峰，但由于該激發(fā)光對(duì)細(xì)胞的傷害小，因此通常多使用該波段光源（多為488nm）。GFP熒光極其穩(wěn)定，在激發(fā)光照射下，GFP抗光漂白能力比熒光素強(qiáng)，特別是在450～490nm藍(lán)光波長(zhǎng)下穩(wěn)定。類似的，GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠(yuǎn)比熒光素標(biāo)記的熒光抗體高，抗光漂白能力強(qiáng)，因此適用于定量測(cè)定與分析。由于GFP熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應(yīng)底物，因此GFP作為一種廣泛應(yīng)用的活體報(bào)告蛋白，其作用是任何其它酶類報(bào)告蛋白。但因?yàn)镚FP不是酶，熒光信號(hào)沒(méi)有酶學(xué)放大效果，因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報(bào)告蛋白，比如螢火蟲熒光素酶等。